高壓滅菌是利用高壓和高熱釋放的潛熱進(jìn)行滅菌。在密閉的容器中，水的沸點(diǎn)因?yàn)檎羝麎毫υ龃蠖?，從而提高蒸汽的溫度，用來進(jìn)行有效滅菌。由于微生物細(xì)胞蛋白質(zhì)在濕熱情況下更容易凝固，因此在相同的溫度下，濕熱的殺菌效果比干熱殺菌更好，同時(shí)濕熱的穿透力也更強(qiáng)。
 

　　二、高壓滅菌器的分類

　　高壓滅菌器主要分為兩大類：下排式壓力蒸汽滅菌器和預(yù)真空壓力蒸汽滅菌器。

　　- 下排式壓力蒸汽滅菌器：包括手提式和臥式兩種。通過熱蒸汽壓迫使冷空氣從底部排氣孔排出，當(dāng)壓力達(dá)到103 kPa至137 kPa時(shí)，溫度可達(dá)121.3℃至126.2℃，通常15至30分鐘即可達(dá)到滅菌目的。

　　- 預(yù)真空壓力蒸汽滅菌器：配有空氣抽真空泵，在通入蒸汽前先將內(nèi)部抽成真空，形成負(fù)壓，使蒸汽更容易穿透。在壓力206 kPa、溫度達(dá)132℃時(shí)，4至5分鐘即可完成滅菌。
 

　　三、高壓滅菌器的使用方法

　　1、手提式高壓蒸汽滅菌器

　　- 使用方法：在鍋內(nèi)加入適量的水，將滅菌物品放入滅菌器內(nèi)，蓋好鍋蓋并擰緊螺絲。打開排氣閥，加熱至沸騰后維持10至15分鐘排盡冷空氣，然后關(guān)閉排氣閥，使壓力升至103 kPa，溫度達(dá)到121.3℃，維持30分鐘。停止加熱，待壓力表降至“0”且溫度降至100℃以下后，打開排氣閥，慢慢開蓋。

　　- 注意事項(xiàng)：切勿在壓力和溫度較高時(shí)打開排氣閥，以免引起培養(yǎng)基劇烈沸騰沖出管口或瓶口，污染培養(yǎng)基。

　　2、臥式高壓蒸汽滅菌器

　　- 使用方法：關(guān)閉排水閥，調(diào)整總閥至“全排”，打開進(jìn)水閥，待水距水表頂端5mm至10mm處，關(guān)閉進(jìn)水閥。裝入物品后，當(dāng)夾層壓力表達(dá)到滅菌需要的壓力時(shí)，將套層中的蒸汽導(dǎo)入消毒室進(jìn)行滅菌。消毒完畢后，根據(jù)物品類型選擇合適的排氣方式。

　　- 注意事項(xiàng)：對操作人員要求高，需經(jīng)過專業(yè)培訓(xùn)。

　　3、全自動(dòng)高壓蒸汽滅菌器

　　- 使用方法：接通電源，注入加熱用水，放入滅菌物品。關(guān)閉蓋子后，在控制板上選擇所需的滅菌程序，設(shè)定滅菌的溫度和時(shí)間，按下“開始”鍵。滅菌完畢后，滅菌器內(nèi)的溫度降至設(shè)定溫度，控制桿鎖自動(dòng)打開。

　　- 注意事項(xiàng)：防止多次使用加熱用水，以免腐蝕滅菌器箱壁和管道堵塞。
 

　　四、高壓滅菌應(yīng)注意的問題

　　- 滅菌包不宜過大過緊，滅菌器內(nèi)物品的放置總量不應(yīng)超過滅菌器柜室容積的85%。

　　- 盛裝物品的貯槽或盒應(yīng)有通氣孔，若無孔，應(yīng)將容器蓋打開。

　　- 布類物品應(yīng)放在金屬、搪瓷類物品之上，避免蒸汽遇冷凝成水珠，影響滅菌效果。

　　- 注意安全操作，每次滅菌前檢查滅菌器是否處于良好工作狀態(tài)。

　　- 滅菌完畢后減壓不要過猛，壓力表回歸“0”位后才可打開蓋或門。
 

　　五、高壓滅菌效果的測定

　　1、化學(xué)指示劑法

　　利用化學(xué)指示劑在一定溫度與作用時(shí)間下受熱變色或變形的特性來判斷是否達(dá)到需要的滅菌參數(shù)。例如，3M壓力滅菌指示膠帶在121℃持續(xù)20分鐘或130℃持續(xù)4分鐘后，膠帶上的白色指示線條會(huì)全部變黑。

　　2、留點(diǎn)溫度計(jì)法

　　利用水銀溫度計(jì)不回流的特性，可以指示滅菌器在滅菌過程中達(dá)到的最高溫度。此法只能驗(yàn)證溫度，不能指示滅菌時(shí)間是否達(dá)到要求。

　　3、自制測溫管法

　　利用一些化學(xué)藥品受熱熔化后再冷卻，晶體的外形不同的特性來判斷溫度是否達(dá)標(biāo)。例如，苯甲酸的熔點(diǎn)為121-123℃，與滅菌器的滅菌溫度基本吻合。

　　4、生物指示劑法

　　利用非致病性的嗜熱脂肪桿菌的芽孢作為指示菌，來測定熱力滅菌的效果。滅菌后取指示劑接種到培養(yǎng)基中，若培養(yǎng)基澄清、顏色沒有變化即說明芽孢被殺死，滅菌效果良好。